摘要: 根據(jù)2015版《中國藥典�9204微生物鑒定指�(dǎo)原則,大多數(shù)非無菌藥品生�(chǎn)過程和部分無菌生�(chǎn)�(huán)境的�(fēng)�(xiǎn)評估中,對所檢出微生物需要�(jìn)行常�(guī)特征分析,即可滿足要求�...
根據(jù)2015版《中國藥典�9204微生物鑒定指�(dǎo)原則,大多數(shù)非無菌藥品生�(chǎn)過程和部分無菌生�(chǎn)�(huán)境的�(fēng)�(xiǎn)評估中,對所檢出微生物需要�(jìn)行常�(guī)特征分析,即可滿足要求。對于非無菌�(chǎn)品的控制菌檢查一般應(yīng)�(dá)到種屬水平。無菌試�(yàn)�(jié)果陽性和無菌生產(chǎn)模擬工藝失敗�(shí),對檢出微生物鑒定至少�(jìn)行達(dá)到種屬水平,必要�(shí)�(dá)到菌株水平。以下簡單介紹一下微生物鑒定方法�
首先通過初篩試驗(yàn),確定純化后的待檢菌株的基本微生物特征,�(jìn)行初步分類。常見的初篩試驗(yàn)包括革蘭染色、芽孢染色、鏡檢觀察染色結(jié)果和�(xì)胞形�(tài)、重要的生化反應(yīng)。其中生化篩選試�(yàn)包括氧化酶試�(yàn)、過氧化氫酶試驗(yàn)和凝固酶試驗(yàn)。初篩實(shí)�(yàn)�(jié)果將為后�(xù)鑒定試驗(yàn)提供依據(jù)�
通過比較微生物的菌落形態(tài)、理化特征和特征化學(xué)成分與典型微生物的差異�(jìn)行的微生物鑒別,屬于微生物表型鑒定,是經(jīng)典的微生物分類鑒定法。目前已有多種商�(yè)化的生化鑒定系統(tǒng),為�(shí)�(yàn)人員省去了繁瑣的�(shí)�(yàn)量,如API試劑條鑒定系�(tǒng)、VITEK 全自動鑒定系�(tǒng)、Biolog自動微生物鑒定系�(tǒng)。近年來一種新型的表型方法,介于表型和基因型之間的MALDI-TOF�(zhì)譜法在微生物檢定�(lǐng)域也取得了較快的�(fā)展。在表型鑒定�(shí),應(yīng)注意采用適宜的培�(yǎng)基、培�(yǎng)�(shí)間和傳代次數(shù)對鑒定結(jié)果的影響。通常�(jìn)行生化鑒定需要待檢菌為新鮮培�(yǎng)物�
微生物基因型通常不受生長培養(yǎng)基或分離活性的影響,只需分離得到純菌落便可用于分析。但是技�(shù)水平需要保證,還需要昂貴的分析�(shè)備和�(shí)�(yàn)材料。基因型鑒定包括16S rDNA�18S rRNA和ITS區(qū)測序鑒定、限制性內(nèi)切酶片段長度多態(tài)�(RFLP)、MLST、全基因組測序等。RiboPrinter 微生物鑒定系�(tǒng)是基于RFLP技�(shù)來區(qū)分菌株,有助于溯源分析�(jìn)行風(fēng)�(xiǎn)評估。當(dāng)然,鑒定的終極手段是包含微生物所有遺傳信息的全基因組測序�
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